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单tlc网址
单tlc网址服务
动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,重排后具有不同基因不同的B淋巴细胞合成不同的tlc网址。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。应用淋巴细胞杂交瘤技术将免疫动物的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,通过HAT筛选,ELISAtlc网址检测,有限稀释克隆化,选择出具有分泌tlc网址功能又能无限繁殖的来源于单一B细胞的杂交瘤细胞。该细胞分泌产生非常均一的、其结构、氨基酸顺序都是一致的,且只针对一种抗原决定簇的高特异性tlc网址,这就是单tlc网址。
单抗的最大优势是它的特异性、均一性、高效性和无限供应性。在免疫学、医学、生物学等领域的基础研究和临床医学上,包括对疾病(包括癌症)的诊断、预防和治疗等方面,均显示出巨大的生命力。
我公司专业从事tlc网址生产和定制服务,以tlc网址平台为核心建立了一系列相关的技术平台和动物养殖基地,来自诊断试剂企业和科研单位的专家曾成功制备几十种不同抗原(同乐城手机版、小分子化合物、肿瘤标志物等)的单tlc网址,并成功开发出相应的免疫诊断试剂盒。
制备过程
1、免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的过程。 一般选用6-8周龄雌性Balb/c小鼠,按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官,刺激相应B淋巴细胞克隆,使其活化、增殖,并分化成为致敏B淋巴细胞。
2、细胞融合 采用眼球摘除放血法处死小鼠,无菌操作取出脾脏,在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。 将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合,并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞。
3、选择性培养 选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基。在HAT培养基中,未融合的骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,不能利用补救途径合成DNA而死亡。 未融合的淋巴细胞虽具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。 只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶,并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,因此能在HAT培养基中存活和增殖。
4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单tlc网址的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单tlc网址的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单tlc网址的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存。
5、单tlc网址的大量制备 单tlc网址的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。
(1)体内诱生法 取Balb/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单tlc网址。约1-2周,可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可获得大量单tlc网址。
(2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单tlc网址,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单tlc网址。但这种方法产生的tlc网址量有限。各种新型培养技术和装置不断出现,大大提高了tlc网址的生产量。
服务内容 服务标准 周期
蛋白单抗 1.2-5株杂交瘤细胞株; 18-20周
2.每株细胞提供2-5mgtlc网址;
3.tlc网址ELISA≥80,000;
同乐城手机版单抗 1.2-5株杂交瘤细胞株; 20-24 周
2.每株细胞提供2-5mgtlc网址;
3.tlc网址ELISA≥80,000;
磷酸化同乐城手机版单抗 1.2-5株杂交瘤细胞株; 20-24周
2.每株细胞提供2-5 mgtlc网址;
3.磷酸化同乐城手机版tlc网址ELISA效价大于80,000;
4.磷酸化同乐城手机版与非磷酸化同乐城手机版效价区分大于16倍(ELISA、Dot Blot);
小分子化合物单抗 1.1-3株杂交瘤细胞株; 20-24周
2.每株细胞提供2-5 mgtlc网址;
3.tlc网址针对小分子偶联物Elisa效价大于80000,同时tlc网址与小分子偶联物的结合能够被小分子化合物特异性的竞争抑制;
蛋白检测配对单抗 1.2-5株杂交瘤细胞株; 22-36周
2.1对ELISA配对检测抗原的tlc网址,包被tlc网址和标记tlc网址各5 mg;


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